轉(zhuǎn)子是離心機用于分離試樣的核心部件,轉(zhuǎn)子規(guī)格、品種的多少是衡量離心機生產(chǎn)技術掌握程度的重要標志,轉(zhuǎn)子一般可分為下列五大類:
固定角轉(zhuǎn)子(Eixed-Angle-Rotor):
主要用于分離沉降速度有明顯差異的顆粒樣品。顆粒在扇形溶地移動的距離很短,碰到外壁的顆粒沿著管壁滑到管底,形成沉淀,因此這種轉(zhuǎn)子能很快地收集沉淀物。分離過程中,由于管壁的作用,在離心管內(nèi)將會引起強烈的對流,對具有相同沉降速率的顆粒會產(chǎn)生不良影響。
水平轉(zhuǎn)子(Siwing-Bucket-Rotor):
主要用于樣品作密度梯度離心。顆粒移動距離長,溶液中的組分相對于管壁的位置在離心過程中和離心后不發(fā)生改變,因此離心效果好,但因顆粒在離心場中是從旋轉(zhuǎn)中沿徑向散離出去,而不是按相互平行的路線沉降。顆粒碰到外壁沿著管壁滑到管底,因此也會產(chǎn)生對流。(但比固定角轉(zhuǎn)子小)低速時啟動或停機時會產(chǎn)生振動,影響分離效果,甩平轉(zhuǎn)子有敞開式和封閉式兩種,一般制備容量大,轉(zhuǎn)速小于10000RPM,離心力場在16000xg以內(nèi)的,作成敞開式,主要用于樣品的初分離。制備容量較前者小,轉(zhuǎn)速大于10000RPM,離心力場在16000xg以上的,為了減少風力的影響,一般作成封閉式,主要用于線粒體、葉綠體、細胞核等的分離和密度梯度離心。
連續(xù)離心轉(zhuǎn)子(Continuous-Flow-Rotor):
主要用于懸浮介質(zhì)中高速分離較小的顆粒物質(zhì),如在培養(yǎng)基中分離細胞,在運轉(zhuǎn)過程中,懸浮樣品以一定速度從轉(zhuǎn)子體中心流入離心池,由于溶液中的組分輕重不同,在離心力場作用下,重粒子具有較大的慣性離心力、沉降快,當流速增大(降低)到一定值時,重粒子將留在離心池外緣底部,而介質(zhì)將從出口流出并帶走較輕的粒子,收集組分的方法是把組分沖洗出離心池或者留在轉(zhuǎn)子體內(nèi),這種轉(zhuǎn)子是利用離心淘析技術對整細胞或大的亞細胞粒子進行分離,在無菌和低溫條件下,被分離的組分,能保持活性,回收率高等優(yōu)點。如果液流方向與離心力方向相反,即降低了粒子運行速度,相當于增長了運行距離,從而提高了分辨能力。
區(qū)帶轉(zhuǎn)子(Zonal-Rotor):
主要用于大容量的密度梯度離心,當實驗所需制備的樣品量多,而甩平轉(zhuǎn)子因受到量的限制時,采用區(qū)帶離心是較好的。主要由帶有四塊葉片的轉(zhuǎn)子體和密封系統(tǒng)組成,轉(zhuǎn)子體和四塊葉片將離心池分為四個扇形小室,阻止溶液在離心池中旋轉(zhuǎn),葉片上有徑向?qū)Ч?,溶液通過導管從中心流向轉(zhuǎn)子體外壁,裝樣和取樣時應小心,裝樣一般在2500∽3000rpm運轉(zhuǎn)中進行,首先將梯度液中較輕的部分通過密封管道泵入轉(zhuǎn)子內(nèi),由于慣性力的存在,梯度液在轉(zhuǎn)子外壁的垂直方向形成均勻的一層,再依次將密度較高的梯度液泵入,隨著密度的增高和梯度液的不斷泵入,密度較低的梯度液被推向中心,直到轉(zhuǎn)子完全裝滿,然后通過密封組件中心輸液管把待分離的樣品(其密度與梯度液中最輕的密度部分還低)加入,接著把密度更低的溶液注入,用以取代中心附近的樣品,裝完后,移去密封組件,蓋上轉(zhuǎn)子蓋,在一定轉(zhuǎn)速離心一定時間后,轉(zhuǎn)速降至2500∽3000rpm,裝上密封組件及輸液管,通過泵入較密的液體到轉(zhuǎn)子的液體由輕至重依次擠出。
區(qū)帶轉(zhuǎn)子避免了用離心管所引起的壁效應(Walleffects)和干擾,提高了分辨率。
垂直轉(zhuǎn)子(Vertical-Tube-Rotor):
主要用于樣品在短時間作密度梯度離心。甩平轉(zhuǎn)子分離粒子位移距離長,分辨能力高,分離后組分的區(qū)帶較寬,便于回收,但所需時間長,垂直轉(zhuǎn)子分離的粒子位移距離等于離心管直徑。